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🩺 Muestras biológicas: concepto de muestra, diferentes tipos. Procedimientos de toma de muestras, manipulación, transporte y conservación. Medidas preventivas frente al riesgo biológico.

TEMA 18. Muestras biológicas y riesgo biológico

Concepto de muestra biológica: porción de tejido, fluido o producto orgánico obtenido de un paciente para su análisis con fines diagnósticos, de cribado, pronóstico o de seguimiento. El RD 664/1997, art. 2.a) define agente biológico como microorganismos (incluidos los modificados genéticamente), cultivos celulares y endoparásitos humanos capaces de originar infección, alergia o toxicidad.

Tipos de muestras

Procedimientos de toma (fase preanalítica)

La fase preanalítica (desde la solicitud hasta el inicio del análisis) concentra la mayoría de los errores de laboratorio. En la venopunción:

Manipulación, transporte y conservación

Identificación y etiquetado

La etiqueta debe pegarse en el tubo (no solo en la petición) tras la extracción y junto al paciente: nombre y apellidos, número de historia/NUHSA, fecha y hora, tipo de muestra y persona que la extrae. Una muestra mal identificada se rechaza.

Medidas preventivas frente al riesgo biológico (RD 664/1997)

Vías de entrada: respiratoria, dérmica/mucosas, parenteral (pinchazo) y digestiva. Los agentes se clasifican en 4 grupos (art. 3) según riesgo de infección, propagación y existencia de profilaxis/tratamiento.

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Preguntas de muestra (35)

1. Según el Real Decreto 664/1997, ¿cómo se define un "agente biológico"?

  1. Microorganismos, incluidos los genéticamente modificados, cultivos celulares y endoparásitos humanos, susceptibles de originar cualquier tipo de infección, alergia o toxicidad
  2. Toda sustancia química capaz de producir una reacción adversa en el organismo humano
  3. Cualquier muestra de sangre, orina o heces remitida al laboratorio para su análisis
  4. Todo equipo de protección individual destinado a evitar el contacto con fluidos corporales

El RD 664/1997 define agente biológico como los microorganismos, incluidos los genéticamente modificados, cultivos celulares y endoparásitos humanos, susceptibles de originar cualquier tipo de infección, alergia o toxicidad.

2. De acuerdo con el RD 664/1997, ¿qué se entiende por "microorganismo"?

  1. Toda entidad microbiológica, celular o no, capaz de reproducirse o de transferir material genético
  2. El resultado del crecimiento in vitro de células obtenidas de organismos multicelulares
  3. Cualquier endoparásito humano capaz de originar una infección
  4. Una bacteria patógena que únicamente afecta al ser humano

El RD 664/1997 define microorganismo como toda entidad microbiológica, celular o no, capaz de reproducirse o de transferir material genético.

3. Según el RD 664/1997, ¿qué es un "cultivo celular"?

  1. El resultado del crecimiento in vitro de células obtenidas de organismos multicelulares
  2. Toda entidad microbiológica capaz de transferir material genético
  3. Un endoparásito humano susceptible de originar infección
  4. Un microorganismo genéticamente modificado de origen vegetal

El RD 664/1997 define cultivo celular como el resultado del crecimiento in vitro de células obtenidas de organismos multicelulares.

4. Según el RD 664/1997, ¿en cuántos grupos se clasifican los agentes biológicos en función del riesgo de infección?

  1. Cuatro grupos (1, 2, 3 y 4)
  2. Dos grupos (alto y bajo riesgo)
  3. Tres grupos (leve, moderado y grave)
  4. Cinco grupos (del 1 al 5)

El RD 664/1997 establece que los agentes biológicos se clasifican, en función del riesgo de infección, en cuatro grupos (1, 2, 3 y 4).

5. Según el RD 664/1997, ¿qué caracteriza a un agente biológico del grupo 1?

  1. Resulta poco probable que cause una enfermedad en el hombre
  2. Puede causar enfermedad grave sin que exista profilaxis ni tratamiento eficaz
  3. Puede causar enfermedad y suponer un peligro para los trabajadores, con profilaxis eficaz
  4. Causa enfermedad grave con muchas probabilidades de propagación a la colectividad

El RD 664/1997 define el grupo 1 como aquel agente biológico que resulta poco probable que cause una enfermedad en el hombre.

6. Según el RD 664/1997, un agente biológico del grupo 2 se caracteriza porque:

  1. Puede causar enfermedad y suponer un peligro para los trabajadores, siendo poco probable que se propague a la colectividad y existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz
  2. Resulta poco probable que cause una enfermedad en el hombre
  3. Causa enfermedad grave y serio peligro sin que exista generalmente profilaxis ni tratamiento
  4. Puede causar enfermedad grave con riesgo de propagación a la colectividad

El RD 664/1997 define el grupo 2 como el agente que puede causar enfermedad y suponer un peligro para los trabajadores, siendo poco probable que se propague a la colectividad y existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz.

7. Según el RD 664/1997, ¿cuál de las siguientes afirmaciones describe correctamente al grupo 3 de agentes biológicos?

  1. Puede causar enfermedad grave y presenta serio peligro para los trabajadores, con riesgo de propagación a la colectividad y existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz
  2. Causa enfermedad grave con muchas probabilidades de propagación y sin que exista generalmente profilaxis ni tratamiento eficaz
  3. Resulta poco probable que cause una enfermedad en el hombre
  4. Puede causar enfermedad siendo poco probable que se propague a la colectividad

El RD 664/1997 define el grupo 3 como el agente que puede causar enfermedad grave y presenta serio peligro para los trabajadores, con riesgo de propagación a la colectividad y existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz.

8. Según el RD 664/1997, ¿qué grupo de agentes biológicos causa enfermedad grave y serio peligro para los trabajadores, con muchas probabilidades de propagación a la colectividad y sin que exista generalmente profilaxis o tratamiento eficaz?

  1. Grupo 4
  2. Grupo 3
  3. Grupo 2
  4. Grupo 1

El RD 664/1997 define el grupo 4 como el agente que causa enfermedad grave y serio peligro para los trabajadores, con muchas probabilidades de propagación a la colectividad y sin que exista generalmente profilaxis o tratamiento eficaz.

9. Según el RD 664/1997, ¿qué contiene su Anexo II?

  1. La lista de agentes biológicos clasificados en los grupos 2, 3 ó 4
  2. La señal de peligro biológico
  3. Las recomendaciones prácticas para la vacunación de los trabajadores
  4. Los niveles de contención y sus medidas

El Anexo II del RD 664/1997 contiene la lista de agentes biológicos clasificados en los grupos 2, 3 ó 4; los del grupo 1 no figuran al estar implícitamente clasificados.

10. Según el RD 664/1997, en caso de duda entre dos grupos de clasificación de un agente biológico, ¿cómo debe procederse?

  1. El agente deberá considerarse en el de peligrosidad superior
  2. El agente deberá considerarse en el de peligrosidad inferior
  3. El agente quedará sin clasificar hasta nueva evaluación
  4. El agente se clasificará siempre en el grupo 1

El RD 664/1997 establece que, en caso de duda entre dos grupos de clasificación, el agente deberá considerarse en el de peligrosidad superior.

11. Según el RD 664/1997, si la exposición se refiere a un agente del grupo 1 sin riesgo conocido, ¿qué consecuencia tiene respecto a la aplicación del Real Decreto?

  1. No resultan de aplicación los artículos 5 a 15
  2. Se aplican únicamente las medidas de vigilancia de la salud
  3. Se aplican todos los artículos sin excepción
  4. No resulta de aplicación ninguna disposición del Real Decreto

El RD 664/1997 dispone que, si la exposición se refiere a un agente del grupo 1 sin riesgo conocido, no resultan de aplicación los artículos 5 a 15.

12. Dentro de la definición de agente biológico del RD 664/1997, ¿cuál de los siguientes elementos se incluye expresamente?

  1. Los microorganismos genéticamente modificados
  2. Los agentes químicos cancerígenos
  3. Los ectoparásitos de origen animal
  4. Los agentes físicos como las radiaciones

La definición de agente biológico del RD 664/1997 incluye expresamente los microorganismos, incluidos los genéticamente modificados, cultivos celulares y endoparásitos humanos.

13. Según la definición de agente biológico del RD 664/1997, ¿qué tipo de efectos son susceptibles de originar estos agentes?

  1. Cualquier tipo de infección, alergia o toxicidad
  2. Únicamente infecciones de carácter grave
  3. Exclusivamente reacciones alérgicas cutáneas
  4. Solamente intoxicaciones por vía digestiva

El RD 664/1997 indica que los agentes biológicos son susceptibles de originar cualquier tipo de infección, alergia o toxicidad.

14. Las precauciones estándar en la manipulación de muestras y pacientes se basan en la premisa de que:

  1. Todo fluido corporal puede contener microorganismos, por lo que se aplican a todos los pacientes con independencia de su diagnóstico
  2. Solo se aplican a los pacientes con diagnóstico confirmado de enfermedad infecciosa
  3. Únicamente se aplican cuando la muestra es de sangre
  4. Solo se aplican a las muestras procedentes del grupo 4 de agentes biológicos

Las precauciones estándar se aplican a todos los pacientes con independencia de su diagnóstico, asumiendo que todo fluido corporal puede contener microorganismos.

15. ¿Cuáles son los principales patógenos transmitidos por sangre en accidentes con material cortopunzante durante la manipulación de muestras?

  1. El virus de la hepatitis B (VHB), el de la hepatitis C (VHC) y el de la inmunodeficiencia humana (VIH)
  2. El virus de la gripe, el sarampión y la rubéola
  3. Las bacterias del género Salmonella, Shigella y Escherichia coli
  4. Los hongos del género Candida y Aspergillus

Los principales patógenos transmitidos por sangre en accidentes con cortopunzantes son el virus de la hepatitis B (VHB), el de la hepatitis C (VHC) y el de la inmunodeficiencia humana (VIH).

16. ¿Cuáles son las vías de entrada del riesgo biológico durante la manipulación de muestras biológicas?

  1. Respiratoria (inhalatoria), dérmica/mucosas, parenteral (pinchazo o inoculación) y digestiva (ingestión)
  2. Únicamente la respiratoria y la digestiva
  3. Exclusivamente la parenteral mediante pinchazos
  4. Solo la dérmica y la respiratoria

Las vías de entrada del riesgo biológico son la respiratoria (inhalatoria), la dérmica/mucosas, la parenteral (pinchazo o inoculación) y la digestiva (ingestión).

17. ¿Qué materia regula el Real Decreto 664/1997, de 12 de mayo?

  1. La protección de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos durante el trabajo
  2. La gestión de los residuos sanitarios en los centros hospitalarios
  3. El transporte de mercancías peligrosas por carretera
  4. La clasificación de los productos químicos peligrosos

El Real Decreto 664/1997, de 12 de mayo, regula la protección de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos durante el trabajo.

18. En la definición de microorganismo del RD 664/1997, la expresión "celular o no" hace referencia a que la entidad microbiológica:

  1. Puede tener o no estructura celular, siempre que sea capaz de reproducirse o de transferir material genético
  2. Debe tener necesariamente estructura celular para ser considerada microorganismo
  3. Solo se considera microorganismo si carece de estructura celular
  4. Únicamente abarca a los virus por carecer de célula

El RD 664/1997 define microorganismo como toda entidad microbiológica, celular o no, capaz de reproducirse o de transferir material genético; la expresión "celular o no" indica que puede tener o no estructura celular.

19. Respecto a la clasificación de agentes biológicos del Anexo II del RD 664/1997, ¿por qué no figuran en él los agentes del grupo 1?

  1. Porque están implícitamente clasificados al recoger el Anexo II solo los grupos 2, 3 ó 4
  2. Porque los agentes del grupo 1 no se consideran agentes biológicos
  3. Porque se recogen en un anexo independiente dedicado al grupo 1
  4. Porque su clasificación corresponde a la autoridad laboral en cada caso

El Anexo II del RD 664/1997 contiene la lista de agentes biológicos clasificados en los grupos 2, 3 ó 4; los del grupo 1 no figuran al estar implícitamente clasificados.

20. Según el RD 664/1997, los endoparásitos incluidos en la definición de agente biológico son específicamente:

  1. Los endoparásitos humanos
  2. Los endoparásitos de cualquier especie animal
  3. Únicamente los ectoparásitos humanos
  4. Los parásitos de origen vegetal

La definición de agente biológico del RD 664/1997 incluye los endoparásitos humanos, junto con los microorganismos y los cultivos celulares.

21. De acuerdo con la clasificación de los agentes biológicos del RD 664/1997, ¿qué criterio diferencia principalmente al grupo 3 del grupo 4?

  1. En el grupo 3 existe generalmente profilaxis o tratamiento eficaz, mientras que en el grupo 4 no existe generalmente
  2. En el grupo 3 no hay peligro para los trabajadores y en el grupo 4 sí
  3. El grupo 3 no causa enfermedad y el grupo 4 sí la causa
  4. El grupo 3 afecta a animales y el grupo 4 al ser humano

Tanto el grupo 3 como el grupo 4 causan enfermedad grave con riesgo de propagación; la diferencia es que en el grupo 3 existe generalmente profilaxis o tratamiento eficaz y en el grupo 4 no existe generalmente.

22. Según el orden de extracción/llenado de tubos establecido por la norma CLSI, ¿cuál de las siguientes secuencias es la correcta?

  1. Hemocultivo → citrato (azul) → suero/gel (rojo o amarillo) → heparina (verde) → EDTA (lila) → fluoruro/oxalato (gris)
  2. EDTA (lila) → citrato (azul) → suero (rojo) → heparina (verde) → hemocultivo → fluoruro (gris)
  3. Suero (rojo) → hemocultivo → heparina (verde) → citrato (azul) → fluoruro (gris) → EDTA (lila)
  4. Fluoruro/oxalato (gris) → EDTA (lila) → heparina (verde) → suero (rojo) → citrato (azul) → hemocultivo

La norma CLSI establece el orden de llenado: hemocultivo, citrato (tapón azul), suero/gel (rojo o amarillo), heparina (verde), EDTA (lila) y, por último, fluoruro/oxalato (gris). Este orden minimiza la contaminación cruzada entre aditivos.

23. ¿Por qué razón el tubo de citrato (coagulación) no debe extraerse en primer lugar durante la venopunción?

  1. Para evitar la contaminación con tromboplastina tisular procedente del punto de punción
  2. Porque el citrato es un anticoagulante de acción muy lenta que requiere reposo previo
  3. Porque siempre debe extraerse después del tubo de EDTA para no alterar el recuento celular
  4. Porque el citrato precipita si entra en contacto con el aire de la primera extracción

El tubo de citrato no debe extraerse en primer lugar para evitar la contaminación con tromboplastina tisular del punto de punción, que alteraría los resultados de coagulación. Además debe llenarse completamente para mantener la proporción 9:1.

24. El tubo de citrato debe llenarse completamente para mantener la proporción correcta entre anticoagulante y sangre. ¿Cuál es esa proporción?

  1. 9:1 (sangre:anticoagulante)
  2. 1:1 (sangre:anticoagulante)
  3. 4:1 (sangre:anticoagulante)
  4. 1:9 (sangre:anticoagulante)

El tubo de citrato debe llenarse completamente para mantener la proporción sangre:anticoagulante de 9:1 (nueve partes de sangre por una de citrato). Un llenado insuficiente altera esta relación y falsea los resultados de coagulación.

25. Según el número de inversiones recomendado para la homogeneización por inversión suave, ¿cuántas veces deben invertirse aproximadamente los tubos de heparina y EDTA?

  1. Entre 8 y 10 veces
  2. Unas 5 veces
  3. Entre 20 y 25 veces
  4. Una sola vez es suficiente

La homogeneización se realiza por inversión suave (no agitar): unas 5 veces el tubo de citrato y entre 8 y 10 veces los tubos de heparina y EDTA. Agitar la muestra puede producir hemólisis.

26. Respecto a la homogeneización de los tubos tras la extracción, ¿cuál es la técnica correcta?

  1. Inversión suave del tubo, sin agitar
  2. Agitación enérgica para mezclar bien el anticoagulante
  3. Centrifugado inmediato sin mezclar previamente
  4. Golpear el tubo contra la mesa varias veces

La homogeneización se realiza por inversión suave (no agitar). Agitar la muestra puede provocar hemólisis y alterar los resultados del análisis.

27. Durante la venopunción, ¿cuál es el tiempo máximo recomendado que el torniquete debe permanecer colocado antes de la punción?

  1. No más de un minuto
  2. No más de cinco minutos
  3. No más de diez minutos
  4. El tiempo que sea necesario, sin límite establecido

Se recomienda que el torniquete no permanezca colocado más de un minuto antes de la punción; si se prolonga, debe retirarse 2-3 minutos y recolocarse.

28. ¿Qué consecuencias puede tener mantener el torniquete colocado más de 2 minutos durante la extracción de sangre?

  1. Hemólisis y hemoconcentración, alterando los resultados
  2. Coagulación inmediata de la muestra dentro de la vena
  3. Aumento del recuento de plaquetas funcionales
  4. Disminución de la presión arterial del paciente

Mantener el torniquete más de 2 minutos puede producir hemólisis y hemoconcentración (estasis venosa), alterando los resultados. Por el mismo motivo no debe agitarse la muestra.

29. Si el torniquete debe prolongarse más del tiempo recomendado, ¿qué actuación se indica?

  1. Retirarlo 2-3 minutos y volver a recolocarlo
  2. Mantenerlo hasta finalizar todas las extracciones
  3. Aflojarlo levemente sin retirarlo en ningún momento
  4. Cambiar de brazo inmediatamente sin retirar el torniquete

Se recomienda que el torniquete no permanezca colocado más de un minuto antes de la punción; si se prolonga, debe retirarse 2-3 minutos y recolocarse para evitar alteraciones de la muestra.

30. Para evitar la hemólisis de una muestra sanguínea durante su manejo en la toma, ¿qué debe evitarse?

  1. Agitar la muestra
  2. Etiquetar el tubo junto al paciente
  3. Invertir suavemente el tubo
  4. Llenar completamente el tubo de citrato

No debe agitarse la muestra para evitar la hemólisis. La mezcla del anticoagulante se realiza siempre por inversión suave del tubo.

31. ¿Cómo se define la fase preanalítica en el proceso de análisis de muestras?

  1. Abarca desde la solicitud médica, indicaciones al paciente, selección de tubos, extracción, transporte y almacenamiento hasta el inicio del análisis
  2. Comprende exclusivamente la interpretación de los resultados por el facultativo
  3. Incluye únicamente la centrifugación y el procesamiento en el analizador
  4. Se limita a la emisión y validación del informe de laboratorio

La fase preanalítica abarca desde la solicitud médica, las indicaciones al paciente, la selección de tubos, la extracción, el transporte y el almacenamiento hasta el inicio del análisis, y es donde se concentran la mayoría de los errores de laboratorio.

32. ¿En qué fase del proceso analítico se concentran la mayoría de los errores de laboratorio?

  1. En la fase preanalítica
  2. En la fase analítica propiamente dicha
  3. En la fase postanalítica de validación
  4. En la fase de archivo de resultados

La fase preanalítica, que va desde la solicitud médica hasta el inicio del análisis (incluyendo extracción, transporte y almacenamiento), es donde se concentran la mayoría de los errores de laboratorio (hasta cerca del 70% según diversos autores).

33. Respecto a la identificación del paciente y el etiquetado de los tubos en la extracción de sangre venosa, ¿cuál es la práctica correcta?

  1. Identificar al paciente de forma inequívoca antes de la extracción y etiquetar los tubos junto al paciente tras la extracción
  2. Etiquetar todos los tubos antes de acudir a la habitación del paciente
  3. Identificar al paciente solo si no se conoce previamente su nombre
  4. Etiquetar los tubos al llegar al laboratorio, una vez agrupadas todas las muestras

La identificación del paciente debe realizarse de forma inequívoca antes de la extracción y el etiquetado de los tubos debe hacerse en presencia del paciente tras la extracción, garantizando la trazabilidad y evitando errores de identificación.

34. Una muestra de orina para urocultivo, en condiciones óptimas, ¿en qué plazo y a qué temperatura debe remitirse al laboratorio?

  1. En menos de 2 horas a temperatura ambiente
  2. En menos de 6 horas congelada a -20 ºC
  3. En menos de 24 horas a temperatura ambiente
  4. En menos de 30 minutos calentada a 37 ºC

La orina para urocultivo debe remitirse al laboratorio en menos de 2 horas a temperatura ambiente; si no es posible, debe refrigerarse a unos 4 ºC (conservándose hasta 24 horas) o emplearse tubo con conservante.

35. Si una muestra de orina para urocultivo no puede remitirse al laboratorio en menos de 2 horas, ¿cómo y durante cuánto tiempo puede conservarse en refrigeración?

  1. Refrigerada a unos 4 ºC, conservándose hasta 24 horas
  2. Refrigerada a unos 4 ºC, conservándose hasta 72 horas
  3. Congelada a -20 ºC, conservándose hasta 7 días
  4. A temperatura ambiente, conservándose hasta 12 horas

Si no es posible remitir la orina para urocultivo en menos de 2 horas a temperatura ambiente, debe refrigerarse a unos 4 ºC, conservándose así hasta 24 horas, o bien emplear un tubo con conservante.

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